顶尖艾滋团队新冠研究：某稀有抗体反复出现提示疫苗线索

新冠病毒进入细胞取决于病毒的S蛋白（spike protein）与人类细胞受体的结合域（RBD）。尽管尚无新冠疫苗，但抗体对全球抗疫至关重要。目前，一支顶尖艾滋病研究团队已从新冠康复者的血浆中提取、鉴定抗体，并发现了高中和活性、稀有但反复出现的RBD特异性抗体。这提示根据该抗体研发的疫苗，可能对大众普遍有效。

以上发现来自医学预印本网站bioRxiv刊发的美国洛克菲勒大学、加州理工大学、霍华德休斯医学研究所、陈·扎克伯格生物中心(Chan Zuckerberg Biohub)的新冠抗体重磅研究：Convergent Antibody Responses to SARS-CoV-2 Infection in Convalescent Individuals。论文刊发时间为当地时间5月15日，通讯作者有美国洛克菲勒大学分子免疫学实验室主任Michel Nussenzweig和Paul Bieniasz教授等。

Michel Nussenzweig教授（左）Paul Bieniasz教授（右）

作为艾滋病领域的顶尖学者，Nussenzweig的研究聚焦于免疫系统固有和适应性反应的分子机制，研究方法结合了生物化学、分子生物学和遗传学。他专注于B淋巴细胞和HIV-1抗体研究。为应对COVID-19暴发，Nussenzweig已将其研究扩展到SARS-CoV-2，并从康复患者体内分离并鉴定高效的中和抗体。

另一位通讯作者Paul Bieniasz教授同样是艾滋病领域的顶尖学者。他的研究试图定义宿主基因如何影响病毒的复制，重点是人类和灵长类动物免疫缺陷病毒。其实验室致力于表征病毒模仿、操纵和以其他方式利用的宿主功能，以及防御细胞针对病毒感染而进化的特征。

当地时间5月13日，世卫组织（WHO）卫生紧急项目负责人迈克尔·瑞安（Mike Ryan）表示，新冠病毒可能成为长期问题，很难预测何时可以战胜病毒，它可能成为永远不会消失的流行性病毒。瑞安以艾滋病为例，指出尽管艾滋病毒没有消失，但人类已找到治疗方法和预防手段，人们也不再像以前那样恐惧艾滋病。

附：研究方法

新冠病毒的S蛋白负责与人体受体结合入侵，这通常是药物研发的重要靶标。在感染过程中，S蛋白被宿主蛋白酶（如TMPRSS2）裂解为N端S1亚基和C端S2亚基，S1和S2分别介导受体结合和膜融合。其中，S1包含N末端结构域（NTD）和受体结合结构域（RBD），在确定组织向性和宿主范围方面至关重要。在病毒入侵人体时，RBD会与人类受体ACE2（血管紧张素转化酶2）结合。

但目前，关于人类对SARS-CoV-2的抗体应答知之甚少。在这项研究中，研究团队报告了68名COVID-19康复者，并且均未住院。这些康复者在症状发作后30天收集的血浆的半最大中和滴度范围分布各不相同，从不可检测（占样本的18％）到低于1：1000（占样本的78％），只有3％的康复者大于1：5000。

抗体克隆显示了RBD特异性记忆B细胞（表达密切相关的抗体）在不同个体中的扩增克隆。尽管血浆滴度较低，但针对RBD上独特表位的抗体的半抑制浓度可以在低至ng/mL级别时进行中和。以此，大多数未住院而从COVID-19中恢复的个体，其恢复性血浆不包含高水平的中和活性。然而，在所有测试的个体中都发现了具有有效抗病毒活性的稀有但反复出现的RBD特异性抗体，这表明根据此类抗体研发的疫苗可能普遍有效。

在2020年4月1日至4月17日之间，有73名符合条件的参与者进入了研究。其中有48名（65.8％）是通过RT-PCR确诊的新冠患者（下称“病例”），25名（34.2％）是诊断病例的密切接触者（下称“接触者”）。有5例没有出现症状的密切接触者被排除在进一步分析之外。

收集样本时，这68人已经至少14天不再有任何症状。只有一名SARS-CoV-2核酸检测是阳性的无症状者，其他67名参与者平均发病时间约为样本采集前30天（17至48天）。在该队列中，症状平均持续10天（0-28天），并且都未入院。最常见的症状是发烧（82.4％），咳嗽（64.7％），肌痛（55.9％）和疲劳（54.4％），合并症则很少见（8.8％）。性别之间，病例与接触者之间，症状的持续时间或严重程度，或症状发作至采集样品的时间之间，没有显著差异。

测试的血浆样本中，88％和66％显示有针对RBD特异的IgG和IgM抗体（高于对照组至少2个标准差）。然而血浆样本中抗三聚体S蛋白的IgG和IgM抗体应答只有40％和21％（高于对照组至少2个标准差）。IgG和IgM抗体水平与样本是发病后多久采集、年龄、性别、病例或接触者之间没有显著差异。相反，IgG抗体与RBD和S蛋白的结合与症状的持续时间直接相关，但IgM抗体与RBD和S蛋白的结合与症状的持续时间无关。最后，对S蛋白的抗体水平，性别间差异不大，但是女性对RBD的IgG结合抗体的效果比男性低。

为了测量恢复性血浆的中和活性，研究者使用假病毒测定法，该方法使用携带纳米荧光素酶报告基因的HIV-1基病毒粒子和SARS-CoV-2 S蛋白。用半最大中和效价（NT50）衡量的队列中的中和活性总体水平通常较低，无法检测到的为18％，低于1000的则为78％。NT50的几何平均值为212（算术平均值=850），只有2个人的NT50达到5000以上。研究认为，中和活性与症状的持续时间和症状严重程度相关，但与症状，年龄，性别或病例/接触状态的发作相关的样品采集时间无关。值得注意的是，结合RBD和S的IgG抗体的水平与NT50密切相关。